关键词： 绿色生态   养殖技术   淡水养殖   技术应用  

摘要： 随着近年来社会经济的快速发展，在我国内陆地区的水产养殖产业得到了大力的发展，水产产品数量逐日递增，全面满足现代人们的水产饮食需求。但是，由于内陆地区水产养殖产业的发展，对于周边的环境生态问题造成了一定的影响，从而致使水产品的质量安全性也产生了威胁。基于此，为了增强淡水养殖对环境的安全性，提升水产品的质量安全，本文将结合绿色生态养殖技术在淡水养殖中的应用进行分析，希望能够为水产养殖户提供简单的参考建议。

关键词： 江苏省   环太湖   淡水养殖   水环境生态评价   底质污染修复  

摘要： 江苏省环太湖淡水养殖是太湖流域社会经济发展中的重要组成部分。淡水养殖在给流域带来食品保障和经济效益的同时,也引发了一系列水生态环境问题,这些问题不仅会影响太湖富营养化治理,而且会影响淡水养殖的品质和效益。本文对2020年9月至2021年8月江苏省环太湖淡水养殖水体的生态环境进行了监测和评价;构建了基于PSR模型的水生态环境指标评价体系、明确了基于障碍度模型的影响因子强度,对江苏省环太湖淡水养殖水生态系统健康进行了评价;并通过构建淡水养殖环境模拟体系,探究了不同修复方法（投加过氧化钙、投加硝酸钙、间歇曝气、投加芽孢杆菌、投加乳酸菌）下养殖水体底泥中污染物的去除效果,解析了修复过程中菌群丰富度及多样性变化,初步探索了修复机理。本文的主要结论如下:（1）江苏省环太湖11个淡水养殖水体全年水的总氮浓度介于0.85-8.11mg/L之间,冬季总氮浓度普遍高于其他季节;湖荡养殖水体总磷、总氮浓度低于池塘养殖水体。CODMn的季节变化趋势不明显,叶绿素a含量呈现春夏秋季高于冬季的特点。浮游植物密度变化特征:夏季>秋季>春季>冬季;浮游动物、底栖生物密度的变化特征为:夏季>春季>秋季>冬季,池塘养殖>湖荡养殖。综合水质标识指数结果表明,Ⅲ类水占比47.73%,Ⅳ类水占比36.36%。综合营养状态指数结果表明,轻度富营养和重度富营养水体各占比40.91%。底泥综合污染指数结果表明,底泥污染程度从重到轻依次为:夏季>秋季>冬季>春季,轻度污染占比15.91%,重度污染占比65.91%。卡尔森营养状态指数结果表明,水体营养水平从高到低依次为:夏季>秋季>春季>冬季。（2）基于PSR模型构建了江苏省环太湖淡水养殖生态系统健康评价体系。评价结果表明,湖荡养殖水体的生态系统健康水平优于池塘养殖水体。其中,生态系统健康评价综合指数得分最高的是W1（宛山湖）,最低的是S4（大北富鲈鱼塘）;健康和亚健康水体分别占比18.18%和54.55%。基于障碍度模型明确了与江苏省环太湖淡水养殖水体水生态健康评价相关的影响因子强度,结果表明影响强度最大的是底泥全氮含量,最小的是底栖生物多样性。（3）底泥氮磷释放及修复实验结果表明,环境pH值越低,底泥TN释放强度越大,pH值越高,TP释放强度越大;DO>6.0mg/L时,底泥总氮、总磷释放受到抑制;扰动强度越大、温度越高,底泥总氮、总磷释放强度越大。Ca O2、Ca（NO3）2、间歇曝气、芽孢杆菌、乳酸菌实验组对上覆水总氮的去除率分别为28.69%、20.08%、42.03%、28.20%、31.35%;Ca O2、间歇曝气、芽孢杆菌、乳酸菌实验组对上覆水总磷的去除率分别为68.25%、50.29%、37.52%、13.33%。Ca（NO3）2实验组和Ca O2实验组的底泥微生物丰富度总体上低于CK组,但在不同门上的表现不同。其中,Ca（NO3）2组中绿弯菌门、厚壁菌门丰富度较CK组分别减少了24.8%、25.75%,但变形菌门增加了65.54%;Ca O2组中变形菌门、厚壁菌门、弯曲杆菌丰富度较CK组分别增加了11.61%、22.35%、131.12%。在属水平上,Ca（NO3）2和Ca O2组的底泥中均发现了与反硝化进程有关的绿弯菌属、厌氧绳菌属。结合前文研究,Ca O2和Ca（NO3）2均对降低体系中的TN浓度有促进作用,从微生物角度来看,Ca（NO3）2组底泥中变形菌门和厌氧硝化菌属的丰富度上升,促进了反硝化脱氮进程,而CaO2则是增加了底泥中变现菌门和厚壁菌门的丰富度,促进了反硝化脱氮进程。

关键词： 氨氮   混合发酵   微生态制剂   固定化  

摘要： 水源中氨氮的积累会导致养殖区内水产品病害频发,并且使养殖区域和周围环境水体富营养化程度加剧,严重制约了淡水养殖业的绿色可持续发展。随着近几年我国微生物技术的逐步成熟,具有改善水体环境、促进水产动物生长、提高养殖效率和水产品质量的微生态产品已经广泛用于淡水养殖过程中。本研究以实验室前期保存的益生菌为起始菌株,研究了多种微生物净水效果和对水体环境的影响,确定了复合微生物发酵培养条件,明确了固定化复合微生物净水剂的制备过程并研究了使用条件,丰富了微生态制剂产品种类,为淡水养殖过程中处理水体氨氮提供了更多选择。主要研究结果如下:(1)微生物净水效果。处理氨氮浓度2 mg/L的人工污水,芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)、乳酸菌(Lactobacillus plantarum,LP)、光合细菌(Rhodopseudomonas palustris,RP)脱氮效果随着微生物投加量增加而上升,酵母菌(Sacchaeomyces cerevisiae,SC)则相反,72小时最佳氨氮去除率分别为25.12%、37.94%、20.19%和21.02%。BS、LP、RP、SC按照0.75%、0.75%、1.0%、0.25%混合使用时,72小时氨氮去除率提高到46.35%。(2)复合微生物扩大培养工艺。混合菌株(BS:RP:LP:SC=3:4:3:1)液态发酵培养,优化培养基成分与发酵条件后,最大活菌数为1.7×10～9 cfu/m L。海藻糖、甘油、脱脂奶粉作为保护剂按照8.5%、2.5%、8.5%混合使用时,冻干后活菌率可以达到80.2%。(3)固定化微生物净水剂的制备与应用。小球制备条件为聚乙烯醇8%、卡拉胶0.5%、生物炭2%、菌液17%、2%氯化钾饱和硼酸溶液常温交联21小时。处理符合淡水养殖条件的人工污水,固定化微生物净水剂48小时最佳氨氮去除率为53.86%,重复使用3次,依旧可以去除水体中40%以上的氨氮,重复利用性好,易于保存、运输和快速活化使用。在水族箱养殖金鱼幼苗过程中使用该净水剂时,对比未投加净水剂水族箱,氨氮增长率7天内可降低156%。

关键词： 阿维菌素   水生生物   神经毒性   肝毒性   免疫毒性  

摘要： 阿维菌素由于其高效、杀虫谱广且残效期长，是目前世界范围内应用最广泛的农药之一。但其对非目标生物，特别是水生生物的毒性作用一直被忽视。本研究通过建立阿维菌素对于鲤鱼的急性损伤模型，进而评价阿维菌素对鲤鱼的非靶标毒性作用，并探讨其毒性产生的可能的作用机制。　　急性阿维菌素暴露致淡水养殖鲤鱼神经毒性。首先，本研究测得阿维菌素对于鲤鱼96 h的半数致死浓度（LC50）为 24.04 μg/L，因此，本研究以 3.005 μg/L和 12.02 μg/L的阿维菌素分别作为体内实验的低、高毒物剂量组，进行 96 h 的急性暴露实验。高效液相色谱（HPLC）分析结果表明，阿维菌素在鲤鱼脑组织内积累，并且阿维菌素暴露后，鲤鱼脑的组织病理切片观察到炎症细胞浸润和神经元坏死，免疫组化（IHC）实验发现炎性因子TNF-α及促凋亡因子Bax的表达均明显增加，说明阿维菌素诱导鲤鱼脑组织损伤，此外乙酰胆碱酯酶（AChE）的生化检测结果显示阿维菌素显著降低了其活性，并且血脑屏障（BBB）紧密连接蛋白ZO-1、Occludin表达降低，说明阿维菌素通过增加BBB的渗透性引发鲤鱼神经毒性。此外，本研究还证明了阿维菌素通过诱导 ROS 的过度累积，增加脂质累积，降低抗氧化酶 CAT、SOD和 GSH-Px的活性引起脑组织产生氧化应激。Western Blot分析显示阿维菌素通过激活 NF-κB信号通路，促进其下游促炎性因子 IL-1β、IL-6、TNF-α及iNOS的mRNA水平升高诱导鲤鱼脑组织炎症。此外，透射电镜还观察到阿维菌素暴露引起的细胞核内染色质边缘化，TUNEL 检测显示脑组织细胞凋亡水平增加， Western Blot进一步证实了促凋亡相关蛋白（Bax、Cytochrome C、Cleaved-caspase3）在阿维菌素的暴露下显著增加，且凋亡的产生与 PI3K/Akt通路的抑制有关，AKT抑制剂阻断实验证明了阿维菌素诱导的NF-κB信号通路的激活部分依赖于其上游PI3K/Akt通路。　　急性阿维菌素暴露致淡水养殖鲤鱼肝脏毒性。首先，本研究发现暴露于阿维菌素的鲤鱼，其肝组织出现细胞水样变性及坏死，且阿维菌素处理显著降低肝细胞L8824的活力，并且乳酸脱氢酶（LDH）的释放量显著增加，因此体内外实验证明了阿维菌素诱导鲤鱼肝损伤。其次，本研究还发现阿维菌素的暴露会抑制肝组织中抗氧化因子血红素加氧酶 1 （HO-1）和醌氧化还原酶 1（NQO1）的蛋白表达，并且抑制鲤鱼肝组织内的抗氧化酶的活性，进而诱导鲤鱼发生氧化应激。然后体外研究发现，阿维菌素刺激导致肝细胞 L8824出现ROS累积，并且出现Ca+含量过载，说明阿维菌素的暴露诱导肝细胞的线粒体功能障碍，随后本研究还发现阿维菌素的体外暴露使线粒体分裂蛋白 Drp1 的蛋白表达异常增加，并且体外实验还证明了线粒体分裂基因Drp1、Fis1及Opa1的mRNA水平在阿维菌素的刺激下而显著增加，而线粒体融合基因Mfn1和Mfn2的mRNA水平却显著降低，说明阿维菌素通过引起线粒体动力学紊乱引发肝组织损伤。接着本研究还证明了阿维菌素暴露还可通过增强促炎性因子的表达进而引起鲤鱼肝组织的炎症。最后，透射电镜观察到阿维菌素暴露后鲤鱼肝组织出现凋亡小体及自噬小体，Western Blot 分析显示阿维菌素在体内外实验中均促进了促凋亡蛋白及自噬相关蛋白的表达，说明阿维菌素诱导了鲤鱼肝组织发生自噬与凋亡，并且NAC抑制剂阻断实验证明了ROS介导了阿维菌素诱导的自噬与凋亡。CQ抑制剂阻断实验证明了自噬的形成可以缓解阿维菌素诱导的鲤鱼肝损伤。　　急性阿维菌素暴露致淡水养殖鲤鱼免疫毒性。本研究发现阿维菌素暴露后的鲤鱼免疫器官脾出现实质结构疏松和炎症细胞浸润。生化分析表明，阿维菌素显著降低了脾组织抗氧化酶 CAT、SOD和 GSH-Px的活性，但增加了氧化损伤标志物丙二醛（MDA）的含量，说明阿维菌素暴露诱导鲤鱼脾组织产生氧化应激。此外，阿维菌素暴露还显著提高了脾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS等炎性因子的转录水平，并显著增强了炎症介质iNOS的活性，但却抑制了抗炎性因子TGF-β1和IL-10的转录水平，说明炎症的产生参与了阿维菌素诱导的鲤鱼脾组织的损伤。最后，TUNEL 检测到脾组织在阿维菌素的暴露虾出现了凋亡，并且凋亡相关基因 Bax、P53、Caspase 3/9 的转录水平也呈剂量依赖性增加。因此说明阿维菌素诱导的鲤鱼免疫毒性与炎症、氧化应激及凋亡的产生有关。　　综上所述，本研究系统的阐明了农药阿维菌素暴露对非靶标水生生物——淡水养殖鲤鱼的神经、肝脏及免疫毒性及潜在机制，强调监测淡水养殖水环境中农药阿维菌素污染的重要性，为靶向防治阿维菌素致鲤鱼神经、肝脏及免疫毒性提供理论参考。

关键词： 甲烷产生潜力   甲烷氧化潜力   产甲烷菌   甲烷氧化菌   农业生产方式转变   温度  

摘要： 甲烷（CH4）是一种短寿命的强效温室气体。政府间气候变化专门委员会（IPCC）第六次评估报告指出在100年的时间尺度上CH4全球增温潜势为CO2的28倍,并再次强调了控制全球CH4排放对减缓升温的重要性。农业湿地是大气CH4的重要排放源。中国作为农业生产大国,水稻种植面积位居世界第二,同时中国也是世界上最大的淡水养殖国家。随着对水产品需求的持续增加,土地资源的可利用空间有限以及农民对扩大收入的迫切需求,我国大量稻田种植转变成了稻田种养结合模式和水产养殖湿地。农业生产方式转变后,稻田种养结合和单一养殖生态系统所特有的农业管理模式会导致其具有不同于常规稻田的CH4排放特征和排放强度。当前针对稻田生产方式转变对CH4排放影响已有大量研究,但多数只对CH4排放通量进行了观测,并未深入探讨CH4的产生和氧化机理,且缺乏微生物层面的机制研究。农业湿地的CH4排放是土壤中CH4产生和氧化综合效应的结果。因此,对湿地CH4的产生、氧化及其相关微生物对不同环境因子的响应研究,将有助于更深入和全面地了解农业湿地CH4排放的过程与机制。 本研究以我国亚热带地区江苏东南部的常规稻田种植体系、由稻田转变来的稻虾种养结合体系和单一虾塘养殖体系为研究对象,分别采取常规稻田（CR）、共作稻区（R-CR）、共作虾区（R-CC）和常规虾塘（CC）土壤样品,测定其甲烷产生和氧化潜力,同时采用荧光定量PCR技术（q PCR）分析CH4相关功能基因丰度,并选取采样年度中期七月份土样进行微生物测序。后续根据试验结果与温度的高度相关性,进一步探究了甲烷产生和氧化潜力对温度的响应。主要的研究结果如下: 1.甲烷产生潜力随时间呈现明显的季节性动态变化,与温度的时间动态变化规律一致。而甲烷氧化潜力在时间效应上的动态变化相对并不明显。 2.农业土地利用类型转变对甲烷产生潜力、甲烷氧化潜力、mcr A和pmo A功能基因丰度均有显著影响。常规稻田转变为稻虾种养结合和常规虾塘养殖后,提高了甲烷产生潜力、降低了甲烷氧化潜力。其中甲烷产生潜力主要受温度、DOC、NH4+-N、p H和Eh影响,而Eh是导致甲氧化潜力发生变化的关键因子。mcr A、pmo A功能基因丰度对理化因子的响应与甲烷产生、氧化潜力具有高度一致性,证实土壤中甲烷产生、氧化是高度依赖土壤微生物的过程。其中DOC、Eh和N素含量是导致土壤中mcr A、pmo A功能基因丰度发生变化的重要因子。 ***测序结果表明,稻田利用方式转变显著改变了产甲烷菌群落结构和甲烷氧化菌在属水平上的群落组成。土壤的产甲烷途径主要为氢型产甲烷途径。当常规稻田转变为稻虾种养结合和常规虾塘养殖生产后,甲烷氧化菌Ⅱ型菌的相对丰度显著提高,而Ⅰ型菌相对丰度大大降低。 4.温度敏感性试验结果表明,甲烷产生潜力对温度的依赖性强于甲烷氧化潜力。甲烷产生潜力随培养温度的升高呈现指数增加,而甲烷氧化潜力仅在低温时较为敏感。通过计算温度敏感性Q10值发现,甲烷产生Q10值在0.98-4.00之间,而甲烷氧化Q10值范围介于0.48-3.01。甲烷产生的Q10值大于甲烷氧化的Q10值,证明甲烷产生是比甲烷氧化更依赖温度的微生物过程。此外农业土地利用类型和温度的交互效应只对土壤甲烷产生潜力存在显著影响,但对甲烷氧化潜力并无显著影响。 5.甲烷产生和氧化潜力是多种因素综合作用的结果,在今后研究过程中应加强多因子及其交互影响对CH4产生和氧化的研究,为揭示农业湿地的CH4排放机理提供数据参考。

摘要： 近年来人们的生活质量不断提高,对于水产产品的需求量有所提升,市场上淡水养殖规模持续扩大.随着人们健康意识的形成,在购买水产产品时重视产品质量,优先选择健康、营养的水产产品,面对人们产品需求的改变,在淡水养殖过程中,需要对养殖技术进行改进和调整.绿色生态养殖技术具有环保性和科学性的优势,能够结合自然优势以及生物特性对养殖计划和技术进行调整,提高各类养殖资源的利用效率,在满足生物生长需求的同时提升水产产品的品质,控制成本投入,避免资源浪费.绿色生态养殖也能够有效避免水产病害的出现,但是绿色生态养殖技术所涉及到的技术要点较多,在应用过程中容易出现技术要点落实不到位的现象.基于此,本文分析了淡水养殖存在问题,提出了绿色生态养殖技术的应用要点,以期可以为淡水养殖提供参考.

关键词： 河蟹养殖技术   淡水养殖   回捕率   优质蟹   党的十八大以来   成蟹养殖   良种良法  

摘要： 党的十八大以来,国家“要下决心把我国种业搞上去”,“一粒种子可以改变一个世界”,优质蟹苗种是河蟹成蟹养殖的基础,是提高成蟹回捕率和品质的重要保障。河蟹养殖业仍然占据着淡水养殖产业的重要位置,我县在河蟹养殖技术上一直探索中前行,在河蟹良种良法创新养殖技术上,做了许多有益的尝试,取得了许多养殖经验和成果。

关键词： 凡纳滨对虾   急性缺氧   表观特征   酶活性   基因表达  

摘要： 【目的】深入挖掘凡纳滨对虾应答缺氧胁迫的生理调控机制,为凡纳滨对虾抗缺氧应激新品种的选育提供理论依据,也为营养素调控缺氧应激提供新的作用靶点。【方法】根据水体溶解氧(DO)含量,分别设对照组(5.00 mg/L DO)、低氧组(2.00 mg/LDO)和缺氧组(0.75 mg/LDO),观测急性缺氧胁迫下凡纳滨对虾的表观特征,于胁迫0、2、6、10和14 h采集凡纳滨对虾肝胰腺组织样品,通过ELISA试剂盒检测LDH、GCK、PK、Cyt c、SOD和CS活性,利用RT-PCR扩增HIF1-α、GLUT、BNIP3、p53、c-fos、Kv1.2、PTEN和VEGF等8个基因,并采用实时荧光定量PCR检测缺氧胁迫下的基因表达变化。【结果】急性缺氧胁迫下,凡纳滨对虾频繁游动,摄食量慢或不进食、蜕壳不遂,虾壳呈黄色或红色,生长速度缓慢并逐渐出现死亡。凡纳滨对虾肝胰腺中HIF1-α、GLUT、BNIP3和VEGF基因相对表达量随缺氧时间的延长呈显著上升趋势(P<0.05,下同),Kv1.2和PTEN基因相对表达量呈显著下降趋势,c-fos和p53基因相对表达量则表现为先升高后降低。缺氧组凡纳滨对虾肝胰腺中LDH、PK和Cyt c的活性随缺氧时间的延长呈显著下降趋势,且始终低于低氧组,而GCK、SOD和CS的活性呈先上升后下降趋势。【结论】凡纳滨对虾会通过产生各种生理生化调节策略来抵御急性缺氧胁迫,包括改变机体能量获取方式、增加能量积累、高表达糖代谢或有氧氧化过程的关键酶、抑制血红细胞凋亡、降低机体代谢率、刺激血管生成等,以降低机体对DO的消耗。

关键词： 小瓜虫病   淡水养殖   水产养殖病害   流行期   防治经验   中草药防治   案例分析  

摘要： 近年来,我区多地时常发生淡水养殖小瓜虫病害,因该病流行期长,对症药物少,治疗难度大,给养殖生产造成较大危害。本人在开展水产养殖病害防治工作指导中,累积了一些防治经验,利用中草药治愈了多起小瓜虫病害,现以飨读者,以供参考。

关键词： 粮食安全   淡水养殖   生态模式  

摘要： 文章从耕地保护和用途管制分析了非粮化整治的大背景,并从统筹粮食安全和渔业持续发展提出了粮渔配套生态模式。